解码P药！如何科学探索片剂药物的元素杂质研究？
发布时间：2023-03-07 17:40 浏览次数：250日前，“新冠口服神药”Paxlovid在国采谈判中流标引发网络热议。
Paxlovid，又称“P药”，是由奈玛特韦片和利托那韦片两种片剂组成的复方抗病毒药物。有数据显示，在中度或重度新冠肺炎患者的治疗中，它可以降低约89%的住院或死亡风险，为新冠治疗带来更多希望。
本期#技术共探，我们将文围绕奈玛特韦片/利托那韦片的元素杂质研究，阐述研究试验过程中的技术要点，以期为更多片剂药物杂质研究中提供专业的技术支持与解决方案。欢迎文末留言讨论！
目标物元素有哪些？
微谱生物医药元素分析实验室可对66种元素进行半定量全扫分析，全扫测试结果将对ICH Q3D中关注的四类元素（24种）进行初步评估，筛选出可能超限值或控制阈值的元素。
ICH Q3D中1类和2A类元素杂质
ICH Q3D中1类和2A类元素杂质是药品生产中禁用或限制使用以及给药途径相关的元素，此两类均是药品质量控制的重要因素。因此，需对1类和2A类中V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb进行方法学验证。
有意和非有意添加物
除此之外，奈玛特韦片/利托那韦片还要考虑是否存在有意添加和非有意添加的物质，如原料药中可能存在的Li；可能经过辅料引入的Cr、Ba和Mo；可能通过热熔过程引入的Si、Mn，为了综合考察各类来源途径中元素杂质的影响，会将以上共13种元素纳入研究。
| 表1：目标物元素确认 | |
| ICH Q3D中1类和2A类元素杂质 | 有意/非有意添加物 |
| V、Co、Ni、As、Cd、Hg、Pb | Li、Cr、Ba、Mo、Si、Mn |
样品消解方案怎么做？
样品准备
奈玛特韦片/利托那韦片组合包装由奈玛特韦（主要活性成分）和利托那韦（CYP3A抑制剂）组成。患者需要按比例同时服用两种药物才能达到治疗效果。因此，在取样时需参照患者实际使用药物的比例，将两种片剂按比例研磨成粉末。
样品消解
样品消解的目的是降低样品基质干扰，满足仪器进样要求，常用的样品处理方法有直接溶解、湿法消解（石墨消解）、微波消解和灰化酸消解法。
奈玛特韦片/利托那韦片经过试验尝试后，不溶于常规无机酸，直接溶解法无效。灰化酸消解法采用马弗炉对样品进行高温灰化，再对灰化后的样品湿法消解。要保证样品灰化充分，一般温度设置在400℃-800℃，马弗炉灰化过程中整个体系不是密封状态，外部环境的干扰影响大于微波消解仪，样品中在灰化过程中含有不确定性（尤其针对易挥发元素），在本次方法学研究样品消解手段中不作为优先考虑对象。
除上述消解方法外，元素分析实验室还分别采用了石墨湿法消解法、微波消解法和石墨湿法-微波消解法进行样品消解。经对比，奈玛特韦片/利托那韦片在「石墨-微波消解法」下可以使样品完全消解至溶液澄清透明。
结果如下表所示：
| 表2：不同消解方式结果对比 | ||
| 消解方法 | _ | 对比结果 |
| 石墨湿法消解 | _ | 单种酸：消解后样品浑浊。多种混合酸：微热后溶液澄清，Si结果存在假阳性。经冷却后再次浑浊。 |
| 微波消解 | _ | 多种混合酸：溶液底部有固体沉淀。 |
| 石墨湿法-微波消解 | _ | 多种混合酸：样品溶液澄清透明，Si结果无假阳性。 |
如何优化仪器方法？
奈玛特韦片/利托那韦片样品溶液所采用的仪器设备为ICP-MS（安捷伦 7900），筛选出目标元素中适合的质量数，采用内标校准的外标法进行定量分析。
适用！案例结果展示
微谱生物医药元素分析实验室对奈玛特韦片/利托那韦片中13种元素（Li、Si、Co、V、Cr、Mn、Ni、As、Mo、Cd、Ba、Hg和Pb）的方法验证结果详见下表。
表3：奈玛特韦片/利托那韦片分析方法验证结果
| 验证指标 | 案例结果（奈玛特韦片/利托那韦片） |
| 线性 | 相关系数在0.9999~1.0000之间 |
| 专属性 | RB＜1/3仪器定量限；回收率范围为95%~109%；RSD范围为1%~6% |
| 定量限 | 回收率范围为95%~109%；RSD范围为1%~6% |
| 准确度 | 回收率范围为93%~109%%；RSD范围为1%~4% |
| 精密度（重复性） | RSD范围为1%~3% |
| 中间精密度 | RSD范围为1%~4% |
| 溶液稳定性 | RSD范围为1%~5% |
| 系统适用性 | 96%~106% |
经验证，该方法专属性强、灵敏度高、准确度高、溶液稳定性强，系统适用性满足要求，方法准确可靠，验证方法适用于奈玛特韦片/利托那韦片中该13种元素杂质的测定。
13种元素线性结果如下图
参考资料：
新冠治疗药：奈玛特韦片/利托那韦片，您了解吗？
MAHASE E.COVID-19:Pfizer’s paxlovid is 89% effective in patients at risk of serious illness,company reports[J].BMJ,2021,375:n2713.doi:10.1136/bmj.n2713.
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